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技術(shù)文章首頁(yè) > 技術(shù)文章 分享!線粒體膜電位熒光探針用來(lái)檢測(cè)細(xì)菌膜電位的工作原理
  • 分享!線粒體膜電位熒光探針用來(lái)檢測(cè)細(xì)菌膜電位的工作原理
  • 點(diǎn)擊次數(shù):3945 更新時(shí)間:2022-09-20
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  •   線粒體膜電位熒光探針是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。其染料以電勢(shì)依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),電位熒光探針聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585nm,Em=590nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,本產(chǎn)品只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514nm,Em=529nm)。線粒體膜電位熒光探針不僅可用于定性檢測(cè),因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè),因線粒體的去極化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。觀察時(shí),只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
     
      線粒體膜電位熒光探針用于檢測(cè)細(xì)胞的線粒體膜電位時(shí)常用的濃度范圍為1~20μg/mL,對(duì)于很多細(xì)胞適宜采用的濃度為10μg/mL。
     
      線粒體膜電位熒光探針用來(lái)檢測(cè)細(xì)菌膜電位的工作原理在于:
      線粒體膜電位熒光探針在所有細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)發(fā)綠色熒光,由于更高的膜電位引起染料分子發(fā)生自聚作用,使得染料的熒光往紅色發(fā)射波長(zhǎng)處遷移,紅色熒光強(qiáng)度增高,此時(shí)紅色/綠色熒光信號(hào)比高。質(zhì)子離子載體比如CCCP,通過(guò)去除質(zhì)子梯度來(lái)破壞線粒體膜電位,從而導(dǎo)致紅色熒光強(qiáng)度降低,此時(shí)紅色/綠色熒光信號(hào)比降低。線粒體膜電位熒光探針的最大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)約482nm和497nm。經(jīng)線粒體膜電位熒光探針標(biāo)記的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀分析(用488nm激發(fā),分別用適合FITC(綠色)和Texas Red(紅色)的發(fā)射濾片來(lái)檢測(cè))。
  • 上一篇:常用作緩沖劑的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用
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